Як розділити альбуміни і глобуліни Likar24.ru

Головна » Захворювання нирок » Як розділити альбуміни і глобуліни
Ротару :В 70 лет выгляжу на 45 благодаря простой методике...

Почему все аптеки молчат? Грибок ногтя боится как огня дешевого...

Алкоголику вместо кодирования подсыпьте незаметно 3-4 капли обычной…

Соломія Вітвіцька: живіт втягнувся за добу, вийшло 22 кг жиру! Їла це ...

Заросли папиллом на шее и в подмышках - признак наличия у вас...

Як розділити альбуміни і глобуліни

БІЛКИ ПЛАЗМИ КРОВІ

У плазмі крові міститься 7% всіх білків організму при концентрації 60 - 80 г / л. Білки плазми крові виконують безліч функцій. Одна з них полягає в підтримці осмотичного тиску, так як білки пов'язують воду і утримують її в кровоносній руслі.

  • Білки плазми утворюють найважливішу буферну систему крові і підтримують рН крові в межах 7,37 - 7,43.
  • Альбумін, транстиретин, транскортином, трансферин і деякі інші білки (табл. 14-2) вьшолняют транспортну функцію.
  • Білки плазми визначають в'язкість крові і, отже, грають важливу роль в гемодинаміці кровоносної системи.
  • Білки плазми крові є резервом амінокислот для організму.
  • Імуноглобуліни, білки системи згортання крові, ?1-антитрипсин і білки системи комплементу здійснюють захисну функцію.

Методом електрофорезу на ацетилцелюлози або гелі агарози білки плазми крові можна розділити на альбуміни (55-65%), ?1глобуліни (2 4%), ?2 глобуліни (6-12%), ?-глобуліни (8-12%) і ?-глобуліни (12-22%) (рис. 14-19).

Застосування інших середовищ для електрофоретичного розділення білків дозволяє виявити більшу кількість фракцій. Наприклад, при електрофорезі в поліакриламідному або крохмальної гелях в плазмі крові виділяють 16-17 білкових фракцій. Метод іммуноелектрофореза, що поєднує електрофоретичний і імунологічний методи аналізу, дозволяє розділити білки плазми крові більш ніж на 30 фракцій. Більшість сироваткових білків синтезується в печінці, проте деякі утворюються і в інших тканинах. Наприклад, ?-глобуліни синтезуються В-лімфоцитами (див. Розділ 4), пептидні гормони в основному секретують клітини ендокринних залоз, а пептидний гормон еритропоетин - клітини нирки. Для багатьох білків плазми, наприклад альбуміну, ?1-антитрипсину, гаптоглобіну, транс-Ферріні, церулоплазміну, ?2-макроглобуліну і імуноглобулінів, характерний поліморфізм (див. розділ 4). Майже всі білки плазми, за винятком альбуміну, є глікопротеїнами. Олігосахариди приєднуються до білків, утворюючи гликозидні зв'язку з гідроксильною групою серину або треоніну, або взаємодіючи з карбоксильною групою аспарагіну. Кінцевий залишок олигосахаридов в більшості випадків являє собою N-ацетілнейраміновой кислоту, з'єднану з галактозою. Фермент ендотелію судин нейрамінідаза гидролизует зв'язок між ними, і галактоза стає доступною для специфічних рецепторів гепатоцитів. Шляхом евддцітоза "постарілі" білки надходять в клітини печінки, де руйнуються. Т1/2 білків плазми крові становить від декількох годин до декількох тижнів. При ряді захворювань відбувається зміна співвідношення розподілу білкових фракцій при електрофорезі в порівнянні з нормою (рис. 14-20). Такі зміни називають диспротеїнемія, проте їх інтерпретація часто має відносну діагностичну цінність. Наприклад, характерне для нефротичного синдрому зниження альбумінів, ?1- І ?-глобулінів і збільшення ?2- І ?-глобулінів відзначають і при деяких інших захворюваннях, що супроводжуються втратою білків. При зниженні гуморального імунітету зменшення фракції ?-глобулінів свідчить про зменшення вмісту основного компонента імуноглобулінів - IgG, але не відображає динаміку змін IgA і IgM. Зміст деяких білків в плазмі крові може різко збільшуватися при гострих запальних процесах і деяких інших патологічних станах (травми, опіки, інфаркт міокарда). Такі білки називають білками гострої фази, так як вони беруть участь в розвитку запальної реакції організму. Основний індуктор синтезу більшості білків гострої фази в гепатоцитах - поліпептид інтерлейкін-1, що звільняється з фагоцитів. До білків гострої фази відносять С-реактивний білок, званий так, тому що він взаємодіє з С-полісахарі-будинок пневмококів, ?1-антитрипсин, гаптоглобін, кислий глікопротеїн, фібриноген. Відомо, що С-реактивний білок може стимулювати

Мал. 14-19. Електрофореграма (А) і денсітограмма (Б) білків сироватки крові.

Мал. 14-20. Протеінограмми білків сироватки крові. а - в нормі; б - при нефротичному синдромі; в - при гипогаммаглобулинемии; г - при цирозі печінки; д - при нестачі ?1-антитрипсину; е - при дифузійної гипергаммаглобулинемии.

систему комплементу, і його концентрація в крові, наприклад, при загостренні ревматоїдного артриту може зростати в 30 разів у порівнянні з нормою. Білок плазми крові а, -антитрипсин може інактивувати деякі протеази, що звільняються в гострій фазі запалення.

Зміст деяких білків в плазмі крові і їх функції представлені в таблиці 14-2.

Альбумін.Концентрація альбуміну в крові становить 40-50 г / л. В добу в печінці синтезується близько 12 г альбуміну, Т1/2 цього білка - приблизно 20 днів. Альбумін складається з 585 амінокислотних залишків, має 17 дисульфідних зв'язків і має молекулярної масою 69 кД. Молекула альбуміну містить багато дикарбонових амінокислот, тому може утримувати в крові катіони Са 2+ , Cu 2+ , Zn 2+ . Близько 40% альбуміну міститься в крові і інші 60% в міжклітинної рідини, однак його концентрація в плазмі вище, ніж в міжклітинної рідини, оскільки обсяг останньої перевищує обсяг плазми в 4 рази.

Завдяки відносно невеликій молекулярній масі і високої концентрації альбумін забезпечує до 80% осмотичного тиску плазми. При гіпоальбумінемії осмотичний тиск плазми крові знижується. Це призводить до порушення рівноваги в розподілі позаклітинної рідини між судинним руслом і міжклітинним простором. Клінічно це проявляється як набряк. Відносне зниження обсягу плазми крові супроводжується зниженням ниркового кровотоку, що викликає стимуляцію системи ренінангіотензінальдрстерон, що забезпечує відновлення об'єму крові (див. Розділ 11). Однак при нестачі альбуміну, який повинен утримувати Na+, Інші катіони і воду, вода йде в міжклітинний простір, підсилюючи набряки.

Гипоальбуминемия може спостерігатися і в результаті зниження синтезу альбумінів при захворюваннях печінки (цироз), при підвищенні проникності капілярів, при втратах білка через обширних опіків або катаболічних станів (важкий сепсис, злоякісні новоутворення), при нефротичному синдромі, що супроводжується альбуминурией, і голодуванні. Порушення кровообігу, які характеризуються уповільненням кровотоку, призводять до збільшення надходження альбуміну в міжклітинний простір і появи набряків. Швидке збільшення проникності капілярів супроводжується різким зменшенням об'єму крові, що призводить до падіння артеріального тиску і клінічно проявляється як шок.

Альбумін - найважливіший транспортний білок. Він транспортує вільні жирні кислоти (див. Розділ 8), некон'югований білірубін (див. Розділ 13), Са 2+ , Сu 2+ , Триптофан, тироксин і трийодтиронін (див. Розділ 11). Багато ліків (аспірин, дикумарол, сульфаніламіди) зв'язуються в крові з альбуміном. Цей факт необхідно враховувати при лікуванні захворювань, що супроводжуються гипоальбуминемией, так як в цих випадках підвищується концентрація вільного ліки в крові. Крім того, слід пам'ятати, що деякі ліки можуть конкурувати за центри зв'язування в молекулі альбуміну з білірубіном і між собою.

транстиретин(Преальбумин) називають тірок-сінсвязивающім преальбуміном. Це білок гострої фази. Транстиретин відносять до фракції альбумінів, він має тетрамерную молекулу. Він здатний приєднувати в одному центрі зв'язування ретінолсвязивающего білок, а в іншому - до двох молекул тироксину і трийодтироніну.

Таблиця 14-2. Зміст і функції деяких білків плазми крові

Альбуміни і глобуліни крові, їх фізико-хімічні властивості, функції.

1. За функції виділяють:

1. Транспортні білки (гемоглобін ® О2, альбумін жирні кислоти).

2. Каталітичні (ферменти),

3. Регуляторні (гормони).

4. Структурні (білки сполучної тканини, мембранні білки).

5. Захисні (антитіла).

6. Скоротливі (актин, міозин).

7. Рецепторні беруть участь в утворенні рецепторів.

2. За формою виділяють:

2. Фібрилярні білки

Прості білки - білки, які побудовані із залишків ?-амінокислот і при гідролізі розпадаються тільки на амінокислоти.

Прості білки по розчинності у воді і сольових розчинах умовно поділяються на: протаміни, гістони, альбуміни, глобуліни, проламіни, глютеліни.

Прості білки по розчинності і просторовому будовою поділяють на глобулярні і фібрилярні. Глобулярні білки відрізняються кулястою формою молекули, розчинні у воді. До цієї групи належать всі ферменти і БАВ.

Серед глобулярних білків можна виділити:

· Альбуміни - розчинні у воді в широкому інтервалі рН (4 -8,5), осідають 70-100% розчином сульфату амонію;

· Поліфункціональні глобуліни з більшою молекулярною масою, важче розчинні у воді, розчинні в сольових розчинах, часто містять вуглеводну частину;

· Гистони - низькомолекулярні білки з високим вмістом в молекулі залишків аргініну і лізину, що обумовлює їх основні властивості;

· Протаміни відрізняються ще більш високим вмістом аргініну (до 85%), як і гістони, утворюють стійкі асоціати з нуклеїновими кислотами, виступають як регуляторні та репрессорние білки - складова частина нуклеопротеинов;

· Проламіни характеризуються високим вмістом глутамінової кислоти (30-45%) і проліну (до 15%), нерозчинні у воді, розчиняються в 50-90% етанолі;

· Глутеліни містять близько 45% глутамінової кислоти, як і проламіни, частіше містяться в білках злаків.

Фібрилярні білки характеризуються волокнистої структурою, практично нерозчинні у воді і сольових розчинах. Поліпептидні ланцюги в молекулах розташовані паралельно одна одній. Беруть участь в утворенні структурних елементів сполучної тканини (колаген, кератин, еластин).

Альбуміни і глобуліни

Фарбування білків сироватки крові і подальша процедура денситометрії дозволяють отримати 5 фракцій білків, іменованих по швидкості їх руху як альбумін, α1-, α2-, β- і γ-глобуліни (рис. 1.4). Кожна з фракцій глобулінів містить декілька специфічних білків. Процедура ЕФ дозволяє встановити:

  1. • зниження вмісту альбуміну;
  2. • збільшення однієї або декількох фракцій глобулінів;
  3. • поява фракції глобулінів, відсутніх в крові здорової людини.

Фракція альбуміну гомогенна, перед нею іноді можна виявити білок, що зв’язує тиреоїдні гормони. У фракції α-глобулінів домінує α1-антитрипсин – інгібітор протеїназ. Фракцію α2-глобулінів формують в основному α2-макроглобулін і гаптоглобин. β-лобуліни часто представлені двома нечіткими піками, які формують трансферрин і апоВ-100; другий пік містить в основному компонент комплементу C3. У фракції γ-глобулінів (імуноглобулінів) окремі білкові ланцюги – це компоненти β-глобулінів. Зниження інтенсивності забарвлення всіх фракцій білка при ЕФ може вказувати на порушення всмоктування білків в тонкій кишці або виражене розведення плазми крові. Протилежну картину можна спостерігати при вираженому згущення крові при істотному збільшенні показника гематокриту. Розвиток синдрому запалення незалежно від його етіології буде супроводжуватися вираженим збільшенням в крові білків гострої фази і збільшенням фракції α1- і α2-глобулінів. Найбільшою мірою при цьому зростає в крові вміст С-реактивного білка, інгібітора протеїназ та амілоїду А.

При хронічному запальному процесі в крові збільшується вміст фракції γ-глобулінів. В умовах загострення хронічного процесу можливе одночасне збільшення в крові вмісту фракцій γ-, α1- і α2-глобулінів. При зниженні синтетичної функції гепатоцитів в крові знижується вміст альбуміну, α1- і α2-глобулінів при істотному збільшенні фракції γ-глобулінів. Навпаки, в умовах лікування цитостатиками фракція γ-глобулінів може бути істотно знижена або навіть відсутнім.

При нефротичному синдромі зміни у фракціях білка залежать від особливостей патологічного процесу. У початковій

стадії патологічний процес може виявлятися тільки вираженою гипоальбуминемией. Пізніше через фільтраційний бар’єр ниркових тілець проходять також α1- і α2-глобуліни. При вираженому незворотному пошкодженні мембрани в сечу можуть виходити і γ-глобуліни.

Ротару :В 70 лет выгляжу на 45 благодаря простой методике...

Почему все аптеки молчат? Грибок ногтя боится как огня дешевого...

Алкоголику вместо кодирования подсыпьте незаметно 3-4 капли обычной…

Соломія Вітвіцька: живіт втягнувся за добу, вийшло 22 кг жиру! Їла це ...

Заросли папиллом на шее и в подмышках - признак наличия у вас...